SVEA C18液相色譜柱是一種常用的反相色譜柱,它以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,因此有較高的碳含量和更好的疏水性,對各種類型的生物大分子有更強的適應能力,適用范圍較廣,是高效液相色譜儀分析中shou選的色譜柱類型。
SVEA C18液相色譜柱的樣品制備:
1、樣品應當盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
2、樣品溶液在進樣前應使用針頭式過濾器對樣品預先過濾。頻繁改變流動相組成,會加速降低柱效。
3、色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得*分離效果,使用時請不要超過200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外zui高操作溫度不要超過60℃。
1、對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中。
2、具有一定惰性,與樣品不產生化學反應。
3、黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命。
4、物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
5、沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。
6、在配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止微量氧與樣品發生作用。
SVEA C18液相色譜柱的保存操作:
1、如果流動相含有酸或無機鹽,應當先用去離子水(20倍柱體積)沖洗干凈。然后用用100%乙腈或甲醇保存色譜柱。后用柱子的接頭密封,并放在穩定的環境中存放。
2、應避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落,避免造成色譜柱性能的降低。